Floresen mikroskop: prinsip saka cara

Panyerepan lan re-emisi cairan anorganik lan organik cahya luwih asil phosphorescence utawa floresen. Bentenipun antarane fénoména punika dadi saka interval antarane panyerepan lan emisi flux cahya. Nalika floresen saka prosès iki kedaden meh bebarengan, nalika phosphorescence - karo sawetara wektu tundha.

informasi sajarah

Ing 1852, ilmuwan Inggris Stokes, sepisanan ngandharaken floresen. Panjenenganipun ngenalaken istilah anyar minangka asil percobaan karo fluorspar, kang emit lampu abang ing cahya ultraviolet. Stokes nyatet fenomena menarik. Punika ketemu sing dawa gelombang radiasi neon tansah luwih saka aliran saka cahya penambah gairah.

Kanggo konfirmasi hipotesis ing abad ka-19 wis ana akeh nyobi. Padha nuduhake sing macem-macem conto fluoresce ing pangaribawa cahya ultraviolet. Antarane bahan, ing antarane bab liyane, wis kristal, resins, mineral, chlorophyll, obatan Crude, senyawa anorganik, vitamins, lengo. Panggunaan langsung alami kanggo tes biologi wiwit mung ing 1930,

Floresen mikroskop: gambaran

Sawetara bahan ing separo pisanan saka pasinaon abad kaping-20 dipameraken utomo dhuwur. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. Thanks kanggo kinerja, kang ora bisa ngrambah dening mbedakake cara, cara saka mikroskop floresen wis dadi alat wigatos ing riset Biomedis lan biologi. Merata asil penting padha dijupuk, lan kanggo bahan.

? kaluwihan apa ora cara mikroskop floresen? Nggunakake bahan anyar wis dadi bisa lan pilihan saka komponen submicroscopic sel Highly tartamtu. Floresen mikroskop bisa ndeteksi molekul siji. A macem-macem alami ngidini identifikasi saka sawetara item bebarengan. Senadyan résolusi spasial winates ing watesan difraksi peralatan, kang, ing siji, gumantung ing sifat tartamtu saka sampel, ing identifikasi molekul ngisor tingkat iki uga cukup bisa. Warna conto sawise autofluorescence mepe ngetokne. fenomena iki digunakake digunakake ing pétrologi, botani, industri semikonduktor.

fitur

Sinau jaringan kewan utawa patogen asring rumit banget utawa banget utawa kuwat banget unspecific autofluorescence. Nanging, nilai ing pasinaon nemu introduksi menyang komponen materi bungah ing dawa gelombang tartamtu lan pemancar kakiyatan aliran cahya perlu. Fluorochromes tumindak minangka alami saged independen ditempelake struktur (katon utawa ora katon). Mangkono padha duwe selectivity dhuwur kanggo target, lan ngasilaken kuantum.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. Floresen mikroskop wis digunakake digunakake wiwit tekane saka alami alam lan tiron. Duwé profil kakiyatan tartamtu saka polusi lan penambah gairah lan diangkah kanggo target biologi tartamtu.

Identifikasi molekul individu

Asring, ing kahanan becik, sampeyan bisa ndhaftar cemlorot unsur kapisah. Iki, ing antarane bab liyane, iku perlu kanggo nyedhiyani swara cekap kurang saka detector lan latar mburi optik. molekul Fluorescein Gagal amarga photobleaching bisa emit nganti 300 ewu. foton. Ing 20% efficiency koleksi proses lan bisa ndhaftar wong ing jumlah 60 ewu.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. Floresen mikroskop adhedhasar photodiodes longsor utawa ping elektronik, diijini kanggo riset mirsani prilaku individu molekul liwat kaloro, lan ing sawetara kasus malah menit.

kerumitan

A Jeksa Agung bisa ngetokake tombol ing sih saka dipatèni latar mburi gangguan optik. Amarga kasunyatan sing akeh bahan ing desain saringan lan lensa ngetokne sawetara autofluorescence, efforts ilmuwan ing orane tumrap sekolah awal tujuan kanggo produksi komponen gadhah floresen kurang. Nanging, nyobi sakteruse wis mimpin kanggo Serat anyar. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. Ing tartamtu, iku ketemu sing mikroskop floresen, adhedhasar total bayangan internal, iku ngidini kanggo entuk latar mburi kurang lan cahya penambah gairah kakiyatan dhuwur.

mekanisme

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. Prinsip mikroskop floresen, adhedhasar total bayangan internal iku nggunakake gelombang evanescent utawa evanescent. Nanging ana ing wates antarane media karo beda indeks bias. Ing kasus iki, Beam cahya liwat prisma. Wis dhuwur bias parameter indeks.

prisma jejer kanggo solusi banyu utawa kaca karo parameter kurang. Yen Beam cahya katuntun ing ing lan amba sing luwih kritis, Beam babar blas dibayangke saka antarmuka. kedadean iki, ing siji, nimbulaké ombak nonpropagating. Ing tembung liyane, lapangan elektromagnetik kui kang penetrates menyang medium karo ngisor bias indeks parameter kadohan kurang saka 200 nanometer.

Gelombang evanescent kakiyatan saka cahya bakal cekap kanggo excite fluorophores. Nanging, amarga saka ambane sedikit sawijining, volume sawijining bakal cilik. Asil punika latar mburi-tingkat kurang.

perubahan

Floresen mikroskop adhedhasar total bayangan internal, dipun karo epi-katerangan. Iki mbutuhake lensa karo maksimum angka dhuwur (ing paling 1.4, nanging iku seng di pengeni sing ngrambah 1.45-1.6), lan sebagian murup apparatus lapangan. Sing terakhir kagayuh kanthi ukuran titik cilik. Kanggo uniformity luwih nggunakake ring lancip, kang diblokir dening bagean saka stream. Kanggo amba kritis, sawise kang ana bayangan total, kita kudu tingkat dhuwur saka refraction saka medium kecemplung ing lensa lan kaca tutup saka mikroskop.